定量藥敏檢測條是一種用于確定抗菌藥物抗微生物的抑菌濃度(M.I.C.)和檢測耐藥機制的定量檢測產(chǎn)品。是將受試菌株接種于瓊脂平板培養基后加貼E-試驗試紙條,孵育培養后根據說(shuō)明書(shū)進(jìn)行判讀,并按照標準指南進(jìn)行分析。此法結合了擴散法和稀釋法的原理設計的濃度梯度藥敏試驗,可進(jìn)行直接定量檢測??捎糜诟鞣N常見(jiàn)菌、苛養菌、分枝桿菌、厭氧菌和真菌等的藥敏試驗。尤其是酵母菌和霉菌的藥敏試驗是一項新的技術(shù),由于影響因素較多,直接藥敏試驗較為困難,E試驗法由于結果準確、穩定,受到廣泛認同。
定量藥敏檢測條的操作步驟:
1、稱(chēng)取一定量MH瓊脂加熱溶解于蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘。待冷至50℃,傾入無(wú)菌平皿,使之在平皿中形成4-5mm的瓊脂層。傾注后講平板放置水平平面,使瓊脂冷卻凝固。靜置于陰涼處待使用。
2、將質(zhì)控菌株接種到TSA平板上,按照固定時(shí)間和溫度進(jìn)行培養。檢查合格后用于質(zhì)控工作菌懸液的制備。
3、將純度滿(mǎn)意的質(zhì)控菌株培養物懸浮于TSB肉湯中,并調整濁度為0.5標準(1*108CFU/ml~2*108CFU/ml)
4、用涂布法將質(zhì)控工作菌懸浮液接種于MH平板上。
5、選取對應的抗生素MIC紙條,用鑷子將紙條拿出貼附于MH平板上,按照規定時(shí)間和溫度進(jìn)行培養。
6、培養到規定時(shí)間后就會(huì )發(fā)現,平板上面均勻的生長(cháng)的細菌以及MIC紙條周?chē)霈F明顯的抑菌環(huán)。而對應定量藥敏檢測條上的數值就是對應濃度的MIC紙條對工作菌的低抑菌濃度。