營(yíng)養肉湯培養基的滅菌方法主要是高壓蒸汽滅菌法，以下從滅菌原理、操作步驟、注意事項、常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法等方面為你詳細介紹：
高壓蒸汽滅菌法利用高溫高壓的水蒸氣來(lái)殺滅包括芽孢在內的所有微生物。在密閉的高壓蒸汽滅菌鍋內，隨著(zhù)壓力的升高，水的沸點(diǎn)也隨之升高，從而使滅菌鍋內的溫度能夠達到121℃甚至更高。在這樣的高溫環(huán)境下，微生物體內的蛋白質(zhì)會(huì )發(fā)生不可逆的變性凝固，核酸結構被破壞，細胞膜的通透性增加，最終導致微生物死亡。
操作步驟
裝載培養基
將分裝好的營(yíng)養肉湯培養基容器(如三角瓶、試管等)合理放置在高壓蒸汽滅菌鍋內。注意容器之間要留有一定的空隙，以保證蒸汽能夠充分流通，使培養基均勻受熱。
避免培養基容器堆放過(guò)于緊密，防止蒸汽無(wú)法穿透，導致滅菌不徹底。
加水
向滅菌鍋內加入適量的水，水位一般要達到滅菌鍋水位線(xiàn)指示的位置。加水過(guò)多可能會(huì )導致水進(jìn)入培養基容器內，污染培養基；加水過(guò)少則可能在滅菌過(guò)程中因水分蒸發(fā)而使滅菌鍋干燒，損壞設備。
關(guān)閉滅菌鍋門(mén)
確保滅菌鍋門(mén)密封良好，防止蒸汽泄漏。檢查門(mén)上的密封圈是否完好，有無(wú)破損或老化現象。如果密封圈有問(wèn)題，應及時(shí)更換。
設置滅菌參數
根據培養基的性質(zhì)和滅菌要求，設置合適的滅菌溫度和時(shí)間。對于營(yíng)養肉湯培養基，通常滅菌溫度設置為121℃，滅菌時(shí)間為15 - 30分鐘。
一些滅菌鍋還具有排氣、保溫等階段的時(shí)間設置，需按照設備說(shuō)明書(shū)進(jìn)行準確設置。
啟動(dòng)滅菌程序
啟動(dòng)滅菌鍋，開(kāi)始加熱。在加熱過(guò)程中，滅菌鍋會(huì )排出內部的冷空氣，以保證鍋內為純蒸汽環(huán)境。當溫度達到設定值后，開(kāi)始計時(shí)滅菌。
滅菌結束與冷卻
滅菌時(shí)間結束后，關(guān)閉滅菌鍋電源，等待鍋內壓力自然下降至零。切勿在壓力未降至零時(shí)強行打開(kāi)滅菌鍋門(mén)，否則會(huì )導致蒸汽噴出，造成人員燙傷，同時(shí)也會(huì )使外界空氣進(jìn)入鍋內，污染培養基。
待壓力降至零后，打開(kāi)滅菌鍋門(mén)，取出培養基。讓培養基在室溫下自然冷卻，避免直接放入冷水中冷卻，以免培養基容器因驟冷而破裂。
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